Implementación de la prueba de dispersión de la cromatina espermática (SCD) para evaluar la fragmentación del ADN en alpacas

Autores/as

  • Fidel R. Mujica Lengua Universidad Nacional de San Cristóbal de Huamanga
  • Mijail Contreras Huamaní INIA-Ayacucho
  • Crissthel Y. Guillén Palomino INIA-Ayacucho

DOI:

https://doi.org/10.51440/unsch.revistainvestigacion.28.1.2020.366

Palabras clave:

fragmentación del ADN, halo de dispersión, calidad seminal

Resumen

La integridad de la cromatina espermática se considera ahora un factor importante en la fertilidad masculina y en el desarrollo embrionario temprano. Los objetivos de este estudio fueron: (1) Registrar las características seminales de las alpacas en estudio, (2) Implementar la prueba simpe y barata de dispersión de la cromatina espermática (SCD) para evaluar la fragmentación del ADN espermático en alpacas y (3) adoptar un control positivo confiable para esta técnica. Se trabajó con 10 alpacas con tres repeticiones (n = 10; r = 3), ocho de las cuales eran del fenotipo Huacaya y dos del fenotipo Suri. Las características seminales fueron típicas de la especie, observándose una amplia dispersion en los datos. La prueba SCD permitió establecer el porcentaje de “Halos” de dispersión de la cromatina espermática (ausencia de fragmentación) y porcentaje de “No halos” (presencia de fragmentación); sin embargo, no se encontró diferencia significativa (P = 0.05) entre los promedios de porcentajes de “No halos”, entre los reproductores que mostraron de manera general “alta calidad” seminal o “baja calidad” seminal, basada en volumen, concentración y motilidad espermática. El tratamiento con NaOH 0.3M por 30 min, utilizado como control positivo, fue efectivo en la producción de fragmentación de ADN espermático. La prueba SCD es una técnica sencilla y barata que puede usarse para evaluar el daño del ADN espermático en alpacas.

Descargas

Los datos de descargas todavía no están disponibles.

Citas

Aravindan G, Bjordahl J, Jost L, Evenson D. Susceptibility of human sperm to in situ DNA denaturation is strongly correlated with DNA strand breaks identified by single-cell electrophoresis. Exp. Cell Res. 1997. 236(1): 231-237.

Banda J, Evangelista S, Ruiz L, Sandoval R, Rodríguez C, Valdivia M, Santiani A. Efecto de dilutores en base a Tris, Tes y leche descremada en la criopreservación de espermatozoides obtenidos del epidídimo de alpaca. Rev Inv Vet Perú. 2010. 21(2): 145-53.

Banks S, King SA, Irvine DS, Saunders PTK. Impact of a mild scrotal heat stress on DNA integrity in murine spermatozoa. Reproduction. 2005. 129: 505–514.

Bordignon V, Smith LC. Ultraviolet-irradiated spermatozoa activate oocytes but arrest preimplantation development after fertilization and nuclear transplantation in cattle. Biol. Reprod. 1999. 61: 1513–1520.

Bravo W, Skidmore A y Zhao X. Reproductive aspects and storage of semen in camelidae. Anim. Reprod. Sci. 2000. 62: 173-193.

Bravo W. Comparación de dos métodos de colección de semen en alpacas. 1987, X Reunión Científica Anual del APPA. UNA - PUNO Perú.

Carretero M. I, Lombrado D, Arraztoa C.C, Giulian S. M, Gambarotta M.C, Neild D. M. Evaluation of DNA fragmentation in llama (Lama glama) sperm using the sperm chromatin dispersion test. Anim Reprod Sci. 2012. 131(1-2): 63-71.

Casaretto, C, Martínez M, Giuliano S, Rubin de Celis E, Gambarotta M, Carretero I, y Miragaya M. Evaluation of Lama glama semen viscosity with a cone-plate rotational viscometer (Internet). Consultado el 23 de mayo del 2019. Andrologia 2012. 44:335-41.

Ciereszko A, Wolfe TD, Dabrowski K. Analysis of DNA damage in sea lamprey (Petromyzon marinus) spermatozoa by UV, hydrogen peroxide, and the toxicant bisazir. Aquat. Toxicol. 2005. 73: 128–138.

Cortés-Gutiérrez EI, Dávila-Rodríguez MI, López-Fernández C, Fernández JL, Gosálvez. Evaluación del daño en el DNA espermático. Actas Urológicas Españolas. 2007. 31(2): 120-131.

Dietrich GJ, Szpyrka A, Wojtczak M, Dobosz S, Goryczko K, Zakowski ˙ Ł., Ciereszko A. Effects of UV irradiation and hydrogen peroxide on DNA fragmentation, motility and fertilizing ability of rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) spermatozoa. Theriogenology. 2005. 64(8): 1809–1822.

Ericsson A, Garner L, Redelman D, Ahmad K. Assessment of the viability and fertilizing potencial of cryopreserved bovine spermatozoa using dual fluorescent staining and two-flow cytometric systems (Internet). Consultado el 24 de mayo del 2019. Gamete Res. 1989. 22: 355-368. Disponible en:

Fernández J, Muriel L, Rivero M, Goyanes V, Vazquez R, Alvarez J. The sperm chromatin dispersion test: a simple method for the determination of sperm DNA fragmentation. J Androl. 2003. 24(1): 59-66.

Gosálvez J., A. Gosálbez A, F Arroyo, JL Fernández, C López-Fernández. Assessing sperm DNA fragmentation in the field: an adaptation of sperm chromatin dispersion technology. Biotechnic & Histochemistry. 2008, 83(5): 247-252.

Halotech DNA. Halomax, kit to assess sperm DNA fragmentation assessment in Camelus dromedarius. 2016. Madrid.

Pérez-Crespo M, Pintado B, Gutiérrez-Adán A. Scrotal heat stress effects on sperm viability, sperm DNA integrity, and the offspring sex ratio in mice. Mol. Reprod. Dev. 2008. 75(1): 40–47.

Portella J, López M, Noriega L, Guzmán, L. (2013). Modelo predictivo de fragmentación de ADN espermático usando parámetros evaluados en un espermatograma. XVI Congreso Peruano de Medicina Reproductiva y I Congreso Latinoamericano de ISMAAR, 05-06 de setiembre. Lima.

Rivera, E. Uso de la yema de huevo y la glicerina en la sobrevivencia de los espermatozoides de alpaca. Tesis. Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia. Universidad Nacional del Altiplano. 1998. Puno-Perú.

Sumar J. y Leyva C. Colección de semen mediante vagina artificial en la alpaca (Lama pacos). Memorias del IV Convención Internacional sobre Camélidos Sudamericanos. 22-27 Noviembre. 1981. Punta Arenas. Chile.

Tsarev I, Bungum M, Giwercman A, Erenpreisa J, Edessen T, Ernst E, Erenpreiss J. Evaluation of male fertility potential by toluidine blue test for sperm chromatin structure assessment. Hum. Reprod. 24(7): 1569-1574.

Vaughan J; Galloway D, Hopkins D. Artificial insemination in alpacas (Lama pacos): A report for the Rural Industries Research and Development Corporation (Internet). 2003 (Consultado el 24 de mayo del 2019). Barton ACT, Australia, RIRDC. 98 p.

Descargas

Publicado

2020-01-01

Cómo citar

Mujica Lengua, F. R., Contreras Huamaní, M., & Guillén Palomino, C. Y. (2020). Implementación de la prueba de dispersión de la cromatina espermática (SCD) para evaluar la fragmentación del ADN en alpacas. Investigación, 28(1), 137–146. https://doi.org/10.51440/unsch.revistainvestigacion.28.1.2020.366

Número

Sección

CIENCIAS BIOLÓGICAS Y AMBIENTALES